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1、适用范围:
适用于各种食品、原料及纯水样品中含有大肠菌群的快速测定。
2、方法原理:
将乳糖、显影剂和选择性培养基分别装入一张纸上。经过培养，可以在纸上生长并发酵乳糖产生酸的细菌被认为是大肠菌群阳性。稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表找出相应的大肠菌群数。

3、方法特点:
与国标法中的九管法相对应，实验的最初步骤简化为一步,和从78 h时间缩短到不到24 h,不再需要大量的辅助设施如培养基的制备、消毒和清洁文化的血管。工作时，可以随时打开包装进行取样和测试。

4、操作方法
(1)样品处理:无菌重25克(或25毫升)的样本采样瓶或均化杯含有225毫升无菌生理盐水,彻底摆脱1:10样品匀浆,并使用1毫升,消除细菌吸管1:10样品匀浆,将它注入试管中包含9毫升无菌生理盐水,摇动试管，稀释1:100。通过类推，每次稀释都要更换一根无菌吸管。
(2)接种:选择两种稀释液接种。普通食品一般用1:10和1:10的两种稀释剂，而饮料和饮用水则用1:10的两种稀释剂。每一部分由三张大纸(连接到10mL)和六张小纸(连接到1mL)组成。每张大纸与每袋两张纸叠放时视为一张纸。用无菌移液管抽取1:10稀释的10ml，放入装有一张大纸(相当于1g样品)的塑料袋中，吸收后平放，重复三次。然后用1mL无菌移液管抽1mL同样的稀释液，涂于装有一张0.1g样品的小纸片的塑料袋上，重复三次。另取1ml无菌移液管，抽取1ml 1:100稀释液，置于装有小纸片(相当于0.01g样品)的塑料袋中，重复三次。
(3)培养:将接种纸(可堆叠)置于37℃培养箱中培养15h-24h。

5. 结果判断和计数:如果纸张变黄或黄色背景上出现红点，则为大肠菌群阳性。纸张保持相同的紫蓝色或在紫蓝色的背景上出现红点，但没有黄色的周围的纸张是阴性的大肠菌群。记录每种稀释液中阳性大肠菌群数量，根据大肠菌群MPN表找出相应的大肠菌群数量。如果接种液的第一次稀释是原溶液，在桌面上找到的结果应除以10，以此类推。

6. 注意事项:当样品的pH值低于pH 7时，应先用1mol/L无菌氢氧化钠(NaOH)将溶液调至中性，以免pH值引起纸张泛黄，影响观察结果。

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食物中大肠菌群的检测方法与步骤

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